限制酶Ⅰ的识别序列和切点是-G↓CATCC-，限制酶Ⅱ的识别序列和切点是-↓GATC-。在质粒上有限制酶I的一个切点，在目的基因的两侧各有1个限制酶Ⅱ的切点。
载体，指在基因工程重组DNA技术中将DNA片段转移至受体细胞的一种能自我复制的DNA分子。三种最常用的载体是细菌质粒、噬菌体和动植物病毒。在实际生活中，胰岛素就可以通过使用载体将已插入胰岛素基因片段的质粒放入大肠杆菌内。经过插入基因片段的质粒就称作载体。该质粒在细菌内可以进行自我复制，并且不会影响到生物原来的活动。
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